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色譜定量的依據(jù)和方法有哪些
點擊: 次 時間:2016-11-23 09:51
一、色譜定量兩大依據(jù)
氣相色譜是用峰面積或者峰高來定量的。依據(jù)如下:
最重要的第一條,就是檢測器的線性響應(yīng)關(guān)系。在所有的色譜檢測器中,除了FPD之外,所有的檢測器都遵從線性響應(yīng),也就是說m=KS。這里m指單位時間內(nèi)到達檢測器的待測物質(zhì)的量(包括質(zhì)量或物質(zhì)的量),K表示線性響應(yīng)系數(shù),S表示檢測器響應(yīng)信號的值。也就是說,檢測器響應(yīng)信號的大小與單位時間到達檢測器的被測物質(zhì)的總量成正比。當(dāng)然我們也知道,這個關(guān)系是有范圍的,match量太大或者太小,都會脫離線性。
其次就是第二條,就是塔板理論。塔板理論充分闡述了峰高與進樣量之間的關(guān)系,或者說他們之間是成正比的。這個可以參考我對塔板理論的說明。
根據(jù)這兩條,可以肯定的說,待測物質(zhì)的峰高與待測物的進樣總量成正比。或者利用微積分可以推斷出,待測物質(zhì)的峰面積和待測物的進樣總量成正比。既然峰高和峰面積都與進樣總量成正比,為什么我們喜歡用峰面積,而不是更簡單的峰高呢?這個問題也很簡單,因為塔板理論不完全正確,峰形經(jīng)常不完全滿足正態(tài)分布,所以峰高的代表性不足。
什么時候峰高能夠有良好的代表性?很明顯,峰形良好而且對稱,成良好的正態(tài)分布曲線形狀的時候。或者說峰形尖銳且對稱的時候。
色譜峰經(jīng)常拖尾,所以用峰面積定量就可以了,峰面積絕大多數(shù)情形下,都具有很好的代表性。但是在檢測器超載,或者模數(shù)轉(zhuǎn)換器超載,或者峰面積積分不準(zhǔn),或者進樣代表性不足的時候,以及一些其他特殊情形下,用峰面積也不能得到正確結(jié)果。但無論如何,用峰面積定量,已經(jīng)是我們可能的最準(zhǔn)確方法了。
二、色譜定量方法
色譜定量方法共四種:外標(biāo)法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法、內(nèi)加法(標(biāo)準(zhǔn)加入法)。
再細分歸一化法還可以分為百分比法,帶校正因子的歸一化法,部分歸一化法等。在這些定量方法中,百分比法和外標(biāo)法最簡單,內(nèi)加法最麻煩。下面講解這些方法各自適合的情況。
當(dāng)我們能精確進樣的時候,也就是能夠保證每一次進樣總的進樣體積都一樣的時候,我們總是傾向于選擇外標(biāo)法,當(dāng)然有些時候也選擇歸一化法。當(dāng)我們無法精確進樣的時候,我們總是傾向于歸一化法。當(dāng)我們無法精確進樣,又無法使用歸一化法的時候,我們總是傾向于選擇內(nèi)標(biāo)法。當(dāng)我們用內(nèi)標(biāo)法也無法解決的時候,我們會選用內(nèi)加法或者叫做標(biāo)準(zhǔn)加入法這個復(fù)雜的方式來定量。
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