概述

紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜，來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。

物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。

一、紫外分光光度計用途

1、檢定物質(zhì)

根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。

2、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照

將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測定條件要相同。

3、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性

4、純度檢驗

5、推測化合物的分子結(jié)構(gòu)

6、氫鍵強度的測定

實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。

7、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定

8、反應(yīng)動力學(xué)研究

9、在有機分析中的應(yīng)用

有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué)，它是在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。

二、紫外分光光度計使用注意事項

1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素

他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應(yīng)定期加以校正。使用紫外分光光度計應(yīng)具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設(shè)備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。

2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此，使用紫外分光光度計必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。

3、紫外分光光度計儀器使用一定周期后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，最好由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作。同時，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學(xué)盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準(zhǔn)，對機械部分進行清潔和必要的潤滑。最后，恢復(fù)原狀，再進行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術(shù)指標(biāo)的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作在最佳狀態(tài)。

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