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可見分光光度計的原理是什么

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國產(chǎn)可見分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

  單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

  式中:A為吸光度;I為透射的單色光強度; I0為入射的單色光強度;T為物質的透射率;k為摩爾吸收系數(shù);L為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;c為物質的濃度。

物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。

國產(chǎn)可見分光光度計目前已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,主要用于檢定物質、與標準物及標準圖譜對照、比較吸收波長吸收系數(shù)的一致性、純度檢驗、推測化合物的分子結構、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定。




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